Методика помогает диагностировать иммунологический фактор, приводящий к мужскому бесплодию. Аббревиатура МАР-тест (англ. MAR-test) обозначает смешанная антиглобулиновая реакция (Mixed Antiglobulin / Agglutination / Reaction).
Данный тест применяется в комплексной диагностике бесплодия с иммунологической природой, когда зачатию препятствует наличие антиспермальных антител IgG и/или IgA, связанных с мембраной мужских половых клеток, которые ухудшают их подвижность, затрудняют транспортировку по репродуктивным путями оплодотворение яйцеклетки.
Такая проблема преодолима при помощи современных вспомогательных репродуктивных технологий, с подробностями которых можно ознакомиться на сайте.
МАР-тест проводится в комплексе с исследованием общей спермограммы.
Что показывает МАР-тест
В норме функционирующий гематотестикулярный барьер здорового мужчины работает как защита сперматозоидов в семенной жидкости от иммунной системы.
Если этот барьер нарушен, то иммунитет запускает выработку специфических аутоантител — антиспермальных.
Они образуются, когда тело считает собственную сперму «чужеродной» и вырабатывает иммунный ответ против нее, атакуя свои половые клетки.
Причинами являются различные патологические процессы:
- бактериальные и вирусные инфекции;
- воспаление (орхит, простатит и др.);
- крипторхизм;
- новообразования яичка или придатка;
- варикоцеле;
- травмы;
- последствия хирургических вмешательств.
В качестве ответа иммунитет вырабатывает антитела, которые выявляются с помощью MAР теста и могут указывать на вторичное(иммунозависимое) бесплодие у мужчин.
Против антигенов ориентированы мембраны различных участков сперматозоида: головки, жгутика, середины или в комплексе.
При лабораторном исследовании спермы смотрят наличие специфических антиспермальных антител –иммуноглобулинов, относящихся к классам:
- IgA -образуются местно, в самой репродуктивной системе (сами яички и их придатки, эпителий семенных протоков),отвечают за барьерные иммунные функции,действуют на поверхности половых клеток, но могут выявляться и в семенной жидкости. Присутствие IgA в большой концентрации клинически значимо,говорит о том, что гематотестикулярный барьер нарушен.
- IgG — поступают из кровотока (их молекулы синтезируются и высвобождаются плазматическими B-клетками), концентрация значительно повышается вследствие нарушения целостности гематотестикулярного барьера,IgG способны долго циркулировать в плазме семенной жидкости и сохраняются в условиях внешней среды в эякуляте.
Как проводится МАР-тест?
Данный скрининг уточняет соотношение в процентах морфологически и функционально нормальных мужских половых клеток с антителами на мембране, к общему количеству столь же нормальных сперматозоидов, только не имеющих антител.
Такие клетки, во всех смыслах «хорошие», но с антиспермальными антителами на наружной мембране, не принимают участия в оплодотворении яйцеклетки. Что может стать причиной вторичного мужского бесплодия.
Есть два способа обнаружения антиспермальных антительных молекул:
- Прямой: выявляет связанные со сперматозоидами антитела в нативном эякуляте.Наиболее часто используемый.
- Непрямой: обнаруживает те, что присутствуют в сыворотке крови или в семенной жидкости (без половых клеток).
Прямой МАР тест основан на реакции, возникающей при смешивании образца свежесобранной необработанной спермы с микрочастицами латекса, на которые наносят человеческие антитела IgA или IgG.
Затем к полученной взвеси эякулята и латексных частиц добавляется специальная моноспецифическая антисыворотка IgG, (анти-IgA или анти-IgG).
Эти покрытые антителами частицы будут распознавать и прикрепляться к той области сперматозоидной мембраны, где находятся антиспермальные антитела, образуя смешанные агглютинаты.
При микроскопии они будут видны, и это доказывает, имеются ли на поверхности половой клетки соответствующие антитела IgA или IgG.
Непрямой тест выполняется путем добавления промытых подвижных половых клеток донора спермы(проверенных на отсутствие антител) к очищенной от клеток сыворотке или семенной жидкости пациента.
Смесь инкубируют при 37 ° C в течение 1 часа. Затем каплю смеси обрабатывают, как в прямом MAР-тесте, смешивая ее с покрытыми моноспецифической антисывороткой IgG (анти-IgG) латексными частицами.
Через 2-3 минуты регистрируется процент подвижных сперматозоидов, связанных с антителами.
Обычно, если 50% или более нормальных подвижных сперматозоидов оказываются связанными с латексными микрочастицами, результат МАР-теста «иммунологическое бесплодие» является положительным и требует дальнейших уточняющих исследований.
Какой тест лучше для скрининга?
Прямой MAR-тест более удобен, проводится быстрее и требует меньшего объема эякулята.
Непрямой — более точен и чувствителен (дает меньше ложноположительных результатов), но сложнее в проведении.
Поскольку анализ проводится со свежей спермой, а инкубация занимает всего 10 минут, тест MAR считают быстрым и простым инструментом скрининга на антиспермальные антитела в эякуляте.
Однако образцы с очень низким количеством сперматозоидов (азооспермия) нельзя оценить с помощью этого метода. Также достоверность результатов может падать в случае высокой вязкости спермы.
MAР-тест показан и будет достоверным для диагностики иммунологического бесплодия у мужчин только,если проводить его совместно со спермограммой, которая оценивает у сперматозоидов в исследуемом образце:
- достаточность количества;
- функциональность состояния;
- норму по подвижности.
Как подготовиться к сдаче МАР-теста
Адекватная подготовка к сдаче анализа -залог точности исследования эякулята и правильности интерпретации его результатов, а значит, постановки диагноза и выбора необходимого лечения.
Правила, необходимые для соблюдения перед анализом (сходны с теми, что рекомендуют перед спермограммой):
- Воздержание от половой жизни минимум 2 дня, но не более недели. Эякуляция за сутки до тестирования может привести к сокращению объема эякулята и количества в нем сперматозоидов. Воздержание более недели может вызвать гибель зрелых половых клеток.
- Не употреблять алкоголь и наркотики.
- За день до сбора материала не стоит пить крепкий чай, кофе, а также курить.
- Не есть жирную или жареную пищу.
- Отказаться от горячей ванны,бани, сауны за сутки до сдачи спермы -гипертермия негативно сказывается на созревании сперматозоидов, оптимальная температура для этого34-35 ° С.
- Не ранее, чем за3-4 дня до исследования проводить любые физиопроцедуры и рентгенологические обследования.
- Рекомендуется ограничить чрезмерные и продолжительные физические нагрузки, а также эмоциональные стрессы перед анализом.
Не рекомендуется проводить исследование:
- Если у вас инфекции: простуда и ОРВИ с повышенной температурой.
- При воспалительных процессах в органах мочеполовой системы (уретриты, простатиты)или ЗППП.
- При приеме некоторых препаратов: гормональных, антибиотиков, антидепрессантов, анаболических стероидов. Исключение – жизненно важные лекарства постоянного применения.
Чтобы нормализовать клинико-лабораторные показатели и повысить достоверность,тестирование проводят после выздоровления или выведения лекарственных препаратов из организма — спустя две недели.
Если назначен повторный тест, нужно придерживаться максимально похожих условий сдачи материала и времени воздержания перед, чтобы снизить разброс реакции.
Рекомендуется:
- Сдавать эякулят непосредственно в клинике, чтобы избежать снижения его качества из-за транспортировки.
- Перед сбором спермы нужно опорожнить мочевой пузырь.
- Перед мастурбацией важно соблюдать гигиену — вымыть руки и половые органы.
- В процессе сбора биоматериала нельзя использовать смазку (в т. ч. слюну) и презерватив.
- Вся порция эякулята должна быть собрана полностью в выданный стерильный контейнер.
Расшифровка МАР-теста
Показатели (отрицательный или положительный с детализацией вероятности иммунологических величин) для пациента интерпретирует лечащий врач.
Любая полученная информация – это не диагноз, результаты нельзя использовать для самостоятельной диагностики и лечения. Только врач-специалист (уролог, андролог) может поставить окончательный диагноз. Он основывается как на результатах взятого теста на антиспермальные антитела, так и на анамнезе пациента, итогах лабораторных анализов, спермограммы и пр.
При одном положительном результате совсем необязательно причиной будет именно иммунологическая причина невозможности зачатия, на это могут влиять:
- Болезни иммунной системы, такие как аутоиммунные нарушения, не связанные напрямую с репродуктивной областью.
- Временные изменения количества и подвижности сперматозоидов в конкретном исследуемом образце биоматериала. Поэтому советуют провести повторные исследования через промежуток времени.
Норма МАР-теста: что означают положительный и отрицательный результаты
Референсные показания,если количество определяемых при оценке агглютинировавших сперматозоидов с антиспермальными антителами классов IgG / IgA (как минимум, одного или обоих):
- менее<10%, тест отрицательный, вероятность бесплодия иммунологического генеза, минимальна или отсутствует;
- 10-39%, положительный (имеется некоторая вероятность иммунологически зависимого бесплодия);
- более 40%, положительный, весьма вероятно бесплодие с иммунологическими причинами.
Лечение аутоиммунного бесплодия
После получения результатов, необходимо получить консультацию лечащего врача относительно преодоления бесплодия. Возможные методы включают:
Иммуносупрессивная терапия, включающая кортикостероиды, но она может иметь побочные эффекты и не дает гарантии результата.
Поэтому в клинической практике при иммуноопосредованном бесплодии чаще с высокой гарантией результата применяют вспомогательные репродуктивные технологии: